《最后的晚餐》是以圣经中耶稣与犹大之间的冲突，来表现人类正义与邪恶的较量，表现特定的人文主题，高扬人文主义的时代精神。达·芬奇通过对人物的心理刻画和戏剧性场面的描绘，深刻地再现了这一斗争的尖锐性。当耶稣说有人出卖了他时，在场的十二个门徒呈现出各种不同的表情和动作：惊讶的、愤怒的、诅咒的、紧张的，特别是犹大张皇失措的举止，刻画得惟妙惟肖。整个画面，情绪变化、性格表现、动势倾向、人物组合都具有明显的戏剧性和冲突感，很好的隐喻了人间光明与黑暗、美善与邪恶的斗争。